技術(shù)文章
Technical articles主要用途
石蠟切片黑色素去色(bleach)試劑是一種旨在使用標(biāo)準(zhǔn)化的化學(xué)分離石蠟方法的基礎(chǔ)上,通過氧化劑處理,使黑色素由棕色變成無色,來識(shí)別存檔中的石蠟包埋組織切片中黑色素成分的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良傳統(tǒng)方法、成功實(shí)驗(yàn)證明的。主要適用于各種石蠟包埋組織切片中的黑色素成分,尤其是腫瘤細(xì)胞的黑色素去色檢測。產(chǎn)品即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,去色明顯。
保存方式
保存在4℃冰箱里;試劑具有腐蝕性,注意操作安全;有效保證6月
用戶自備
小型染色缸:用于組織染色操作
烘箱:用于脫蠟處理
光學(xué)顯微鏡:用于組織染色后觀察分析
實(shí)驗(yàn)步驟
一、 脫蠟處理
1. 取出10片待測的石蠟包埋的5微米厚組織切片
2. (選擇步驟)放進(jìn)80℃烘箱,孵育30分鐘
3. (選擇步驟)室溫下靜置15分鐘
4. 按下表依次放進(jìn)小染色缸里孵育
1. 小心移去切片上的清理液(Reagent E)
二、 去色處理
1. 小心加上500微升氧化液(Reagent F),鋪滿整個(gè)樣品表面
2. 室溫下,孵育5分鐘(注意:可以延長至2小時(shí),例如眼晴組織)
3. 小心移去切片上的氧化液(Reagent F)
4. 室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(Reagent E)中孵育2分鐘
5. 小心移去切片上的清理液(Reagent E)
6. 小心加上200微升去色液(Reagent G),鋪滿整個(gè)樣品表面
7. 室溫下,孵育1至2分鐘,或直至無色
8. 小心移去切片上的去色液(Reagent G)
9. 室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(Reagent E)中孵育2分鐘
10. 小心移去切片上的清理液(Reagent E)
11. (選擇步驟)復(fù)染(注意:建議使用通用型蘇木素伊紅染色試劑盒-GMS10030)
12. 透明處理
13. 放上蓋玻片或封片
14. 即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀察:
黑色素――淺棕或深棕色變成無色(見附圖)
細(xì)胞核――藍(lán)色(復(fù)染
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品為50次操作
2. 操作時(shí),須戴手套
3. 脫蠟試劑可以重復(fù)使用
4. 試劑具有腐蝕性,注意操作安全
5. 試劑溶液在樣品表面時(shí),避免有氣泡存在,同時(shí)確保鋪滿樣品表面
6. 氧化液(Reagent F)孵育時(shí)間5分鐘至2小時(shí)不等,皮膚組織為5分鐘,眼睛組織為2小時(shí)
7. 組織細(xì)胞染色完成后,即刻進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察
8. 本公司提供系列組織生物化學(xué)成分染色分析試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定去色明顯